全自動核酸提取儀是分子診斷常用工具,分子診斷是以核酸作為檢測對象,主要應(yīng)用于臨床各科的診斷中,如腫瘤、感染、遺傳等各方面,而核酸提取是分子診斷實驗的“第一步”。近年來,磁珠已成為核酸提取過程中常用的工具之一。
磁珠表面覆蓋有一層TiO2材料,可以選擇性的與磷酸化的氨基酸殘基:絲氨酸(Ser)、酪氨酸(Tyr)、蘇氨酸(Thr)結(jié)合,而與酸性的氨基酸殘基的非特異性結(jié)合最小。與傳統(tǒng)的IMAC技術(shù)相比,其靈敏度提高了1000倍,富集后磷酸化蛋白的質(zhì)譜檢出限達(dá)100fmol。
谷胱甘肽(GSH)磁珠
該磁珠表面包被有瓊脂糖,并偶聯(lián)有谷胱甘肽,可以特異性的與谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)結(jié)合,因而可用于純化帶有GST標(biāo)簽的重組蛋白。TALON"磁珠。TALON磁珠的原理是基于采用Co離子的固定化金屬離子親和技術(shù)(IMAC),可用于純化帶有組氨酸標(biāo)簽(6xHis)的重組蛋白。
ProteinA和ProteinG磁珠
帶有ProteinA或ProteinG基團(tuán)的磁珠,可廣泛應(yīng)用于IgG的純化、免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)等。
硅質(zhì)膜磁珠
這是一類最早出現(xiàn)的產(chǎn)品,廣泛應(yīng)用于DNA、RNA的純化。其原理類似于使用硅質(zhì)膜的離心柱,磁珠在高鹽條件下與核酸結(jié)合,而在低鹽環(huán)境下被洗脫,可用于全血、組織、細(xì)菌、病毒、植物等的核酸純化。
反相RPC磁珠
類似于反向?qū)游龅脑?,可用于多肽的分離純化。Jimenez等使用KingFisher96和Dynabead?RPC18磁珠僅需20min就可以平行處理96個樣品,用于與疾病相關(guān)的血清中肽段表達(dá)譜的研究。
ChargeSwitch磁珠
ChargeSwitch磁珠的原理類似于離子交換技術(shù),磁珠在pH&6.5的緩沖液中帶正電,可與帶負(fù)電的核酸結(jié)合;在pH<8.5的緩沖液中磁珠帶負(fù)電,使得之前吸附的核酸從磁珠上釋放。ChargeSwitch磁珠可在KingFisher平臺上使用。